脂肪是人體中的重要物質(zhì),通過食物攝取脂肪是維持正常生理功能所必需的。食品中的脂肪含量通常通過索氏提取法進(jìn)行測(cè)定,而全自動(dòng)索氏提取儀在這一過程中提供了便捷和準(zhǔn)確的測(cè)定手段。以下是在使用全自動(dòng)索氏提取儀進(jìn)行食品脂肪測(cè)定時(shí)應(yīng)注意的一些關(guān)鍵因素:
一、樣品加入量的控制:
固體樣品:準(zhǔn)確稱取均勻樣品2g~5g(精確至0.01mg),必要時(shí)與海砂混合后全部移入濾紙筒內(nèi)。
液體或半固體:準(zhǔn)確稱取均勻樣品5g~10g(精確至0.01mg),在蒸發(fā)皿中加入約20g的海砂,攪勻后于沸水浴中蒸干,然后在95℃~105℃時(shí)進(jìn)行干燥。確保樣品研細(xì)后裝入濾紙筒,蒸發(fā)皿及附有試樣的玻璃棒,均用沾有乙丨醚的脫脂棉擦凈所用器皿,并棉花也放入濾紙筒內(nèi),減少誤差。樣品應(yīng)干燥后研細(xì),裝樣品的濾紙筒一定要緊密,不能往外漏樣品,實(shí)驗(yàn)過程中不能接觸明火。
二、樣品的抽提及試劑的選擇:
傳統(tǒng)的索氏提取器比較簡(jiǎn)單,由幾根玻璃管與蒸餾瓶組成的,操作過程比較復(fù)雜,需要入員技術(shù)要求比較高。格丹納全自動(dòng)索氏抽提儀免去了繁瑣的操作,由設(shè)備通過程序自動(dòng)完成蒸餾、淋洗、萃取等操作,大大減少人力操作的誤差,節(jié)省了試劑上的浪費(fèi)。全自動(dòng)索氏提取儀在抽提食品脂肪時(shí)將濾紙筒放入索氏脂肪抽提器的抽提管內(nèi),連接已干燥至恒重的接收瓶,由抽提器上端加入無水乙丨醚或石油醚至接收瓶?jī)?nèi)容積的三分之二處,通過加熱裝置于72℃左右加熱回流抽提,控制重復(fù)次數(shù)為每小時(shí)20次左右,一般抽提(6~12)小時(shí)。
樣品含水量較低時(shí)可選擇無水乙丨醚,而含水量高時(shí)則應(yīng)選用石油醚作為溶劑。在干燥器中的冷卻時(shí)間一般要一致。
選擇石油醚作為溶劑,因?yàn)檠跖c水能形成氫鍵使穿透組織能力降低,使乙丨醚抽提能力下降;石油醚溶解脂肪的能力雖然比乙丨醚弱些,但吸收水分比乙丨醚少,使用時(shí)允許樣品含有微量水分,沒有膠溶現(xiàn)象。
三、抽提結(jié)束:
取下接收瓶稱重,回收乙丨醚或石油醚,待接收瓶?jī)?nèi)溶劑剩1mL~2mL時(shí),在水浴上蒸去乙丨醚或石油醚,脂肪燒瓶在烘箱中干燥時(shí),瓶口側(cè)放,以利空氣流通。而且先不要關(guān)上烘箱門,與90℃以下鼓風(fēng)干燥10min~20min,驅(qū)盡殘余溶劑后再將烘箱門關(guān)緊,升至所需95℃~105℃,烘干(1~2)小時(shí),放入干燥器內(nèi)冷卻30min稱至恒重。樣品和醚浸出物在烘箱中干燥時(shí),時(shí)間不能過長,以防止極不飽和的脂肪酸受熱氧化而增加質(zhì)量。
四、檢驗(yàn)樣品中脂肪是否提取完丨全的方法:
觀察提取筒中溶液的顏色,一般測(cè)定脂肪的食品樣品會(huì)含有少量色素,當(dāng)提取劑無色時(shí)可以認(rèn)為脂肪已經(jīng)提凈,也可以用滴管提取筒內(nèi)乙丨醚一滴滴在報(bào)紙片上,對(duì)光觀察,若無油跡可以認(rèn)為提取完丨全。